Bevis på vävnadsstrukturer, antikroppar och patogener genom immunmärkning är populärt, modernt och exakt. Immunfluorescens hänför sig till immunmärkning med beredda fluorescerande antikroppar som görs att lysa under UV-ljus.
Vid Direkt upptäckt av immunofluorescens substratet undersöks direkt med lysande antikroppar, utan primära antikroppar eller artificiella antigener.
Vad är direkt immunofluorescensdetektion?
Direkt detektering av immunofluorescens är en diagnostisk metod baserad på kunskap om immunologi, immunfärgning och immunohistokemi. Fokus här är på antikropparnas förmåga att binda till specifika punkter i vävnad eller till antigener i ett serum. Dessa platser är epitoper.
Vid biokemisk diagnostik finns det konstgjorda antikroppar eller mimetika (singular: mimetiska) som gör det möjligt att markera dessa antikropp-antigenbindningar med fluorescens eller radioaktivitet. Konstgjorda antikroppskonjugat binder sig å ena sidan till epitoperna och å andra sidan har en fluorescerande markör i fallet med immunofluorescens. Detta är ett alternativ till att använda radioaktiva markörer. Det speciella med immunfluorescens direkt detektion jämfört med indirekt detektion är att antikroppen som binder till antigenens epitop i det undersökta materialet också representerar antikroppskonjugatet med den lysrörsmarkören. Ytterligare antikroppar är inte nödvändiga för direkt detektion.
Fluorescein, som lyser under UV-ljus, och fluoresceinisotiocyanat (FITC) används som färgämnen för att göra de konstgjorda antikroppskonjugaten i immunfluorescens. Hittills läser det lite komplicerat, men direkt upptäckt av immunofluorescens är en diagnostisk metod för medicinsk laboratorium för en mängd olika medicinska frågor. Antikropparna med det fluorescerande färgämnet är redo för försäljning.
Funktion, effekt och mål
Direktdetektion av immunofluorescens finns tillgängligt för vävnadsundersökningar för färgning av vissa strukturer i vävnad. Men de är också tillgängliga för enstaka celler. Flödescytometri spelar en viktig roll här. Slutligen finns det fastämnes- och flytande fasimmunanalyser. Immunofluorescensundersökningar av vävnader är särskilt viktiga inom onkologi, d.v.s. den medicinska behandlingen av cancersjukdomar.
Tumorspecifika antigener i tumörvävnad kan detekteras direkt med immunofluorescens. Dessa undersökningar av vävnadsprover från tumörer är ofta viktiga för att ta reda på var de befintliga metastaser kom ifrån kroppen, eller för att bedöma om en tumör är godartad eller malig. Undersökningen av enskilda celler med direkt immunofluorescensdetektion används för att hitta virusantigener, bakteriella antigener och andra epitoper.
Till exempel kan du ta reda på om cellerna är infekterade av ett virus och vilket stadium av infektionscykeln cellerna befinner sig i. Namnet FACS (= fluorescensaktiverad cellsortering) är en mycket effektiv flödescytometri-metod där cellerna markerade med fluorescens fördelas till olika provrör beroende på färgtyp. Denna procedur är viktig inom immunologi, hematologi och infektionssjukdomar.
Immunofluorescensimmunanalyser möjliggör direkt detektion av miljöförgiftningar, genetiskt modifierade organismer och vissa tillsatser i livsmedel. I denna experimentella inställning finns det alltid en fast och en vätskefas. Många patogener, inklusive HIV-viruset som orsakar AIDS, kunde också detekteras direkt. När man upptäcker infektionssjukdomar och autoimmuna sjukdomar handlar det dock ofta om att upptäcka antikroppar snarare än antigener. Dessa är försvarsmolekylerna som bildas av kroppens immunsystem. Enligt den definition som presenteras här är sådana bevis inte direkta bevis, eftersom de fluorescerande antikropparna inte kopplas direkt till kroppens egna antigener, utan till antigenen i testarrangemanget.
Dessa antigener i den experimentella uppsättningen är i sin tur kopplade till kroppens egna antikroppar. Direkt upptäckt av immunfluorescens för vanliga infektioner, till exempel HIV-virus och klamydia, används endast i speciella detekterings- och bekräftelsestester. Det finns tester för många fler sjukdomar. I de flesta situationer är indirekt detektion av antikroppar mer lämpad för infektionssjukdomar, eftersom kroppens eget immunsystem har en genial förmåga att komma ihåg tidigare infektioner. I andra situationer kompletterar direkt detektion av antigener och indirekt detektion av antikroppar varandra. Det senare visar att en infektion har inträffat tidigare, medan de förstnämnda ger mer exakt information om den aktuella statusen för patogenens aktivitet.
Du hittar din medicin här
➔ Läkemedel för att stärka försvaret och immunsystemetRisker, biverkningar och faror
Vid direkt upptäckt av immunofluorescens, som med alla medicinska bevis, finns det två risker: risken för ett falskt, positivt resultat och risken för ett falskt, negativt resultat. Falska, positiva resultat orsakar psykologiskt besvär och stor stress för patienten.
Därför läggs ytterligare testförfaranden till positiva resultat, särskilt om diagnosen leder till drastiska livförändringar. Risken för ett falskt negativt resultat är att patienten inte lär sig om hotet mot sin egen hälsa och kanske till och med för folkhälsan i god tid. Därför är det bra att göra en hel del forskning och att göra och erbjuda ett stort antal olika immunfluorescens direkta detektioner redo för försäljning. Tillsammans med andra direkta och indirekta detekteringsmetoder för sjukdomar och patologier ökar detta diagnosens noggrannhet.
Direkt detektion är baserad på antikroppskonjugatet, som å ena sidan binder till antigenens epitoper och å andra sidan också orsakar fluorescensen. En sådan produkt används därför endast i en typ av testförfarande och används inte för andra typer av testförfaranden.Detta är en viktig procedurskillnad till det indirekta beviset, i vilket de fluorescerande antikropparna föregås av primära antikroppar för epitopbindning. Antikroppskonjugatet är därför lämpligt för olika test. Denna procedurella skillnad skiljer sig från den medicinska skillnaden mellan indirekt detektion av antikroppar och direkt detektion av antigener.
